domingo, 30 de marzo de 2014

Platelmintos


Son gusanos aplanados dorsoventralmente, representados en su mayoría por especies parásitas de diversos animales. Aunque parte de ellos son de vida libre. Se clasifican en tres tipos: turbelarios, trematodos y cestodos.
TURBELARIOS
COLECTA:
Son de vida acuática y se los encuentra en aguas dulces, para poderlos colectar se debe buscar en lugares con poca luz (bajo piedras o raíces de plantas acuáticas). Los métodos para su captura son:
·         Levantar piedras lentamente
·         Colectar plantas acuáticas y revisarlas con cuidado
·         Se puede lograr que salgan de la vegetación acuática depositándola en recipientes con agua del medio. A medida que el oxígeno se vaya agotando, los gusanos saldrán y se podrán ver en las paredes del recipiente.
·         Algunos platelmintos, como las planarias pueden capturarse dejando sebos en el agua, como pedazos de carne cruda
·         Se deben colectar con el filo de un cuchillo, no con pinzas porque se les puede aplastar
Otros turbelarios pueden encontrarse en tierra en lugares muy húmedos y sombreados, hay muchas especies en la vegetación húmeda de las selvas tropicales.
En México, algunas especies viven en la piedras o en los ladrillos, guardadas en lugares con sombra y húmedos. En el campo pueden buscarse sobre piedras cubiertas de musgo que son siempre húmedas.
Una buena técnica para colectarlos en selvas o bosques húmedos consiste en buscar troncos podridos que se encuentran sobre el suelo y descortezarlos poco a poco, para buscar platelmintos que se refugian normalmente en estas cortezas.

CONSERVACIÓN:
Cuando los especímenes no se van a usar para preparaciones definitivas se deben conservar en formol al 2% ó al 5%. También se pueden conservar en alcohol al 70%, es recomendable fijar los especímenes cuando estén bien extendidos. Para lograr que se extiendan se deben poner en un vidrio de reloj o caja Petri con agua del medio, después se le añade el fijador caliente (50-60°C) y luego se transfieren al fijador puro.
Si los especímenes serán usados para preparaciones definitivas,  se sigue el mismo método con fijadores específicos (F.A.A o bien, el fijador GILSON) y los especímenes se guardan en alcohol al 70% haciéndolos pasar antes por alcoholes más débiles.
Para fijar los especímenes más grandes es mejor narcotizarlos, esto se logra poniendo a los especímenes en un disco de Siracusa con agua de su medio y agregando cristales de cloretona o mentol por más de cuatro horas. Cuando queden insensibles se ponen entre dos portaobjetos amarrados con una liga y se le agrega el fijador por un lado.
Numerosas especies se pueden cultivar de manera más o menos sencilla debido a su vida libre.

TREMATODOS
COLECTA:
La mayoría son platelmintos parásitos en diversos órganos en vertebrados tienen ciclos con fases larvarias y con huéspedes intermediarios. Viven en las granjas y debajo de las escamas de los peces, en las cavidades nasales, hígado, pulmones, vejiga urinaria, etc., pero más comúnmente en el tubo digestivo de cualquier vertebrado.
Para colectarlo se recomienda colocar al posible huésped en una charola (recubierta de parafina) para disección y ahí revisarlo bajo el microscopio estereoscópico o hacer la disección del organismo.
La revisión de los órganos del posible huésped puede hacerse sumergiéndolos o bañándolos periódicamente
en suero fisiológico. Se corta el tubo digestivo en secciones para revisar parte por parte. Extraiga los parásitos bajo el microscopio con un pincel fino, pipeta, aguja para disección o pinzas pequeñas y trasládelos a una caja Petri con suero fisiológico. Se recomienda no mezclar los parásitos de un órgano con los de otro o de secciones diferentes, para poder estudiarlos de manera exacta.
Los peces pueden tener ectoparásitos bajo las escamas. Para colectarlos existen 2 técnicas:
·         Buscar nódulos sobre la superficie del pez y abrirlos, es probable que contengan parásitos adultos o larvas.
·     Separar las branquias y sumergirlas en agua de mar o en suero fisiológico, buscar los parásitos observando este material al microscopio. Tanto los trematodos y los cestodos son difíciles de cultivar, aunque se ha logrado mediante cultivos sintéticos y huéspedes intermediarios.

FIJACIÓN:
Una vez obtenidos los parásitos y separándolos en cajas Petri con suero fisiológico limpio, se fijan entre dos portaobjetos colocándolos en Bouin o F.A.A. y sublimado acético.

TINCIÓN:
Se pueden teñir con hematoxilina o carmín. Se lavan, se deshidratan y se dejan en creosota durante 24hrs o más y se montan en bálsamo.
Para teñir los parásitos de peces se pueden usar los siguiente colorantes:
       1.       Pracarmín de Maeyer
       2.       Hematoxilina de Delafield
     3.       Colorante acuoso de Horen (éste da mejor resultado para colorear los parásitos de peces en solución acuosa diluida)
La mayoría de los parásitos después de deshidratados se aclaran en aceite de clavo y por último se montan en bálsamo de Canadá.

 CESTODOS
COLECTA:
Son gusanos endoparásitos con aspecto de listón, segmentados, conocidos comúnmente como tenias o solitarias; se encuentran en el tubo digestivo de vertebrados terrestres y de algunos
peces cartilaginosos.
Para extraerlos, se diseca a los huéspedes. Se sumergen en una solución salina los intestinos grueso y delgado y se buscan los cestodos. Si se localizna las cintas, se busca con cuidado el escólex, siguiendo bajo el microscopio, el extremo más delgado y se transfiere a una caja petri con una solución salina limpia. El cuerpo se pone en otra caja. Las planarias pueden mantenerse, por lo general, en acuarios con vegetación adecuada.

FIJACIÓN:
Se colocan entre dos portaobjetos y se fijan con F.A.A., Bouin o formol al 5% ó alcohol caliente al 70%.  El escólex deberá ir con algunos segmentos y puede teñirse con carmín-bórax.
Se deben lavar los cestodos antes de fijarlos y después tratarlos con ácido crómico al 1% y después se fijan con una solución preparada de F.A.A.

Una vez fijados se transfieren durante 24hrs a alcohol de 50% y se hacen (varios cambios). Finalmente se almacena en una solución de formol-alcohol. Para las planarias existe una técnica específica: la de Chao Fa Wu. Esta consiste en  colocar a la planaria en un portaobjetos con una gota de agua del medio y cubrirla con otro portaobjetos más largo. Por capilaridad se le coloca ácido crómico al 1% y extraer el exceso de agua con un papel filtro. Pasados unos minutos se sumerge la preparación, sin quitarle el portaobjetos, dentro del fijador y pasadas 24 horas (según el fijador empleado), se pueden conservar por tiempo indefinido en alcohol de 70% o formol al 5%
Tinción de planarias: Primero se deben lavar perfectamente y dejarse blanquear en vapores de cloro o en peróxido de hidrógeno para poder observar los órganos internos.  Se tiñen con colorantes básicos como la hematoxilina. Algunas técnicas para su tinción son la técnica de Guyer para planarias o la técnica con carmín-bórax.


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